domingo, 9 de agosto de 2020

PCR DE METILACIÓN EN CARDIOPATÍA HIPERTENSIVA

Se ha investigado la asociacion de la hipermetilacion del promotor CBS con el riesgo de generar Hipertención Arterial

Usando PCR cuantitativa específica de metilación, se determinó los niveles de metilación de cistationina β-sintasa. El gen CBS se amplificó con los siguientes cebadores: 5'-GGATGGAGTTATA TTATGAAGGT-3 'para el cebador directo y 5'-AACAATC TCGCTCAATCG-3' para el cebador inverso.

La reacción se llevó a cabo en las siguientes condiciones: 

desnaturalización a 95 ° C durante 600 seg

45 ciclos a 95 ° C durante 20 seg

hibridación a 56 ° C durante 45 seg y 72 ° C durante 20 seg

Se realizó un paso de la curva de fusión a 95 ° C durante 15 seg y 60 segundos a 60 ° C, con un aumento de temperatura de 0,11 ° C por segundo hasta 95 ° C para medir la señal de fluorescencia.


Referencias:

https://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1807-59322019000100208&script=sci_arttext

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