Sistema CRISPR / Cas9 y la posibilidad de la edición genómica para Cardiopatia Hipertensiva

Tema: Clonación posicional de nucleótidos de rasgos cuantitativos para la presión arterial y el intervalo QT cardíaco mediante la edición dirigida CRISPR / Cas9 de un nuevo ARN largo no codificante

Tipo de edición: in vivo, somático(embriones) 

Dirigidos hacia: gen RFFL con ARN no codificante largo predicho (lncRNA), Rffl-lnc1

Dirigidos por: CRISPR / Cas9

Uso de Vectores: oligonucleotido donante

Órgano/ célula a tratar: embriones en estadio monocelular de rata Dahl S y la cepa congénica S.LEW

Vía de administración: parenteral, microinyecciones

Resultados: función cardíaca y una contractilidad significativamente mejoradas

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5578691/

TERAPIA CELULAR (STEM CELLS) EN CARDIOPATIA HIPERTENSIVA

La terapia celular en el contexto de enfermedades cardiovasculares, se efectua para promover la regeneración del tejido lesionado, por ejemplo, tejido lesionado como resultado de un infarto de miocardio. Teniendo en cuenta que la hipertensión arterial es el principal factor de riesgo asociado con los eventos cardiovasculares; de esta forma la reducción en los niveles de presión arterial es bastante beneficiosa.

Las células madre mesenquimales (MSC) como modelo de terapia en hipertensión arterial, se ha demostrado que inducen la angiogénesis y mejoran la función endotelial.

En el estudio se evaluó, si el cebado de MSCs (células madre mesenquimales) con medio de crecimiento endotelial (EGM-2) aumenta sus efectos terapéuticos en ratas espontáneamente hipertensas (SHR); donde se les administró una inyección intraperitoneal de solución con MSC cultivadas en medio convencional; y se demostró que hubo una reducción prolongada de la presión arterial, una disminución de la hipertrofia cardíaca, una mejora en la respuesta de vasodilatación dependiente del endotelio a la acetilcolina.

Esta técnica ha demostrado el potencial terapéutico de las células madre / progenitoras de la médula ósea para mejorar la rarefacción vascular o disfunción endotelial, mediante el cebado de MSC con medio basal endotelial más factores de crecimiento (medio de crecimiento endotelial-EGM-2) , que parece potenciar su raíz, capacidad angiogénica y potencial terapéutico, podría proporcionar una alternativa terapéutica segura y eficiente a la hipertensión arteria

Referencias:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4537741/

ADN RECOMBINATE EN LA NATURALEZA, ADN RECONBINANTE ARTIFICIAL EN CARDIOPATIA HIPERTENSIVA Y TRANSGENICOS

 ADN recombinante en la naturaleza 

Un claro ejemplo de ADN recombinante que ocurre en la naturaleza, es el entrecruzamiento cromosómico o crossing over.

La recombinación es el proceso mediante el cual se obtiene una nueva molécula de ácido nucleico formada por la combinación de diferentes secuencias. El entrecruzamiento cromosómico o crossing over es el intercambio de material genético que se produce en la línea germinal. 

Durante la formación de óvulos y espermatozoides, en el proceso de meiosis, los cromosomas emparejados de cada progenitor se alinean de manera que las secuencias similares de ADN de cada parte de cromosomas se puedan cruzar entre sí. 

En los seres humanos, el entrecruzamiento cromosómico genera una mezcla del material genético y es una causa importante de la variación genética observada en la descendencia.

Referencia

https://link.springer.com/referenceworkentry/10.1007/978-3-642-27833-4_1351-4?access=true

ADN recombinante artificial en Cardiopatía Hipertensiva 

Las nuevas técnicas de ADN recombinante han podido idear un tentativo método de tratamiento. Los péptidos inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (ACEIP), dependen de la hidrolisis enzimática y se han usado previamente para tratar la hipertensión. 

Las secuencias de codificación de ACEIP de TFP e YFP se unieron a través de un enlazador de arginina y se expresaron en la cepa NC8 de Lactobacillus plantarum mediante un vector inducible pSIP-409. Utilizando las enzimas de restricción Nco I y Hind III, el gen gusA presente en pSIP409 se reemplazó por genes que codifican una proteína (con péptidos inhibidores de la ECA), produciendo el vector de expresión recombinante pSIP409-ACEIP.

Los resultados muestran que la administración oral de RLP disminuye drásticamente la presión arterial, la producción de endotelina y angiotensinógeno II, y los niveles de triglicéridos sin efectos secundarios observados, así como también un mayor nivel de óxido nítrico; que indica su posible aplicación en la hipertensión y enfermedades relacionadas.

Referencia

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4687296/

Vacas Transgenicas

En relación con la calidad nutricional de la leche,en Argentina, lograron una ternera de raza Jersey, a la que llamaron Rosita Isa, que es el primer clon bovino bitransgénico obtenido en el país y también el primero en el mundo al cual se le han incorporado dos genes humanos que codifican dos proteínas presentes en la leche humana de alta importancia para la nutrición de los lactantes. Dichos genes codifican para las proteínas lisozima y lactoferrina humanas. Las proteinas son inmunomoduladores, entre otras características. También hay desarrollos en vacas que producen leche con más caseína (para la fabricación de queso) o que resisten enfermedades, como la mastitis.

Referencia

http://www.argenbio.org/biotecnologia/152-5-los-animales-transgenicos

PCR DE METILACIÓN EN CARDIOPATÍA HIPERTENSIVA

Se ha investigado la asociacion de la hipermetilacion del promotor CBS con el riesgo de generar Hipertención Arterial

Usando PCR cuantitativa específica de metilación, se determinó los niveles de metilación de cistationina β-sintasa. El gen CBS se amplificó con los siguientes cebadores: 5'-GGATGGAGTTATA TTATGAAGGT-3 'para el cebador directo y 5'-AACAATC TCGCTCAATCG-3' para el cebador inverso.

La reacción se llevó a cabo en las siguientes condiciones: 

desnaturalización a 95 ° C durante 600 seg

45 ciclos a 95 ° C durante 20 seg

hibridación a 56 ° C durante 45 seg y 72 ° C durante 20 seg

Se realizó un paso de la curva de fusión a 95 ° C durante 15 seg y 60 segundos a 60 ° C, con un aumento de temperatura de 0,11 ° C por segundo hasta 95 ° C para medir la señal de fluorescencia.

Referencias:

https://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1807-59322019000100208&script=sci_arttext

PRUEBAS DE TAMIZAJE Y CONFIRMATORIA PARA LA CARDIOPATÍA HIPERTENSIVA

Las pruebas de tamizaje son pruebas de diagnóstico temprano cuando la enfermedad es asintomática, en HTA para detectar se puede utilizar el esfingomanómetro o tensiómetro  con el cual se puede medir la tensión  arterial sistólica y diastólica (TAS y TAD), si  los resultados son elevados podría padecer esta enfermedad.

Después de realizar una historia clínica y analizar todos los factores se toma esta prueba con el fin de asegurar un diagnóstico, si la presión arterial tiene valores iguales o superiores a 140/90 mmHg se debe realizar dos o más pruebas confirmatorias con lecturas separadas por dos minutos. Además se puede utilizar M.A.P.A. Holter de presión arterial el cual registra durante un tiempo determinado las cifras que se produce por la tensión arterial de forma precisa, sin riesgo para el paciente, esta prueba solo se toma cuando hay episodios de hipo/hipertensión, hipertensión oculta/enmascarada.

Referencias 

https://scielo.conicyt.cl/pdf/rchcardiol/v36n3/0718-8560-rchcardiol-36-03-00264.pdf

https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?pid=S0718-85602010000100012&script=sci_arttext

https://www.salud.mapfre.es/pruebas-diagnosticas/cardiologicas/m-a-p-a-holter-de-tension-arterial/